我們體外表達蛋白過程經常會遇到蛋白失活的現象，蛋白質失活受多種因素影響，除了與蛋白本身特性外，儲存條件也是關鍵。

比如溫度，水，PH，離子強度，保存時間以及容器等，不合適的儲存條件會造成蛋白聚合，重要氨基酸的變化比如二硫鍵還原，肽鍵水解，氨基酸消旋，色氨酸，甲硫氨酸的氧化等，所以合適的保存條件對蛋白的穩定性至關重要，下面具體介紹幾種常用的保存方法。

目前蛋白保存以液體保存和凍干保存為主。因蛋白不同維持蛋白穩定選擇措施不同。

液體保存

選擇液體保存可以從溫度，pH,蛋白濃度以及保護劑添加幾個因素考慮。

溫度：一般蛋白質低溫保存，短期可以4℃保存，長期可以儲存于-20℃或-70℃，用時迅速融化。

pH：大多數蛋白質在較窄PH范圍穩定，一般在等電點附近，可調整合適pH范圍保存。

蛋白濃度：液體蛋白質受水化影響，保存濃度不易過低，過低濃度會造成多亞基蛋白和輔助因子解離，變性，聚集沉淀，需要調整合適的蛋白濃度。

保護劑添加：長期保存蛋白（酶類）常常加入某些穩定劑，比如糖類，多元醇（甘油），多糖，氨基酸及其衍生物。還有一類離子穩定劑如鹽類

凍干保存

制成干粉或結晶凍干是將溶劑或懸浮介質在低溫下冷凍，然后將其由固態直接升華為氣態的一種干燥方法。該方法能夠很好地保持物質骨架的穩定性，并且在復融后也不改變。

凍干一般包括三個過程：預凍結、升華干燥、解析干燥。

盡管凍干能夠較好的維持蛋白的穩定性，但是在凍干過程中添加必要的穩定劑以防止蛋白質的變性尤為重要，這其中以非還原型的海藻糖和蔗糖對蛋白質的保護最有效。凍干過程應該避免使用還原型糖，如葡萄糖，麥芽糖，乳糖等，其會引起美拉德（Maillard）反應降解蛋白質。因此在冷凍干燥過程中選擇合適的保護劑。

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