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新品來襲┃Biolinkedin? Ni、Co、Cu、Zn(NTA / IDA)全新凝膠系列來襲,玩轉您的His蛋白純化!153
產品簡介 Biolinkedin? His 標簽蛋白瓊脂糖凝膠系列產品(IDA / NTA)可以用于各種表達來源(如大腸桿菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳動物細胞)的組氨酸標簽(6xHis-tag)蛋白的純化。 Biolinkedin相關知識點推薦 Porath和同事發明了第一個IMAC瓊脂糖樹脂,他們將金屬離子通過亞氨基二乙酸(IDA)固定到瓊脂糖上。現在商品化IMAC瓊脂糖仍廣泛使用IDA配體,次氮基三乙酸(NTA)在1987年被Hochuli和同事首次引入商品化IMAC中[3]。在那之后,盡管有其他專用螯合配體(例如TED,TALON?)陸續問世,但IDA和NTA始終代表最常用的親和純化蛋白IMAC瓊脂糖。從結構上看,IDA與NTA的區別在于NTA多了一個羧甲基基團。從化學性質上看,額外的功能基團使得NTA與金屬離子的配位能力更強,因為NTA擁有四個效價,而IDA只有三個,如表1所示。 表1 IDA與NTA的比較 IDA也有其自身優勢,配有IDA配體的瓊脂糖通常價格稍低一些。另外,三價配體在洗脫蛋白時需要的咪唑溶液濃度比四價的NTA低。最后,IDA分子更小,可以更高的密度結合到基質上,因此能結合更多的金屬離子。通常來說,低裝載密度可提高目的蛋白純化質量降低目的蛋白純化產量;而高裝載密度可提高目的蛋白產量,但會增加非特異性結合。綜合考量IDA或NTA的裝載密度與不同金屬離子的親和性和特異性(圖7),可以提高特定蛋白的純化產量及質量。 圖7 IMAC常用金屬離子的相對親和性和特異性。一方面,銅親和力高從而純化蛋白產量高,但是特異性較低。 另一方面,鈷親和力較低但特異性高,從而能減少洗脫液中非目的蛋白。 蛋白純化篇—金屬螯合親和技術:IDA & NTA,Ni2+ & Co2+ - 上海翎因生物科技有限公司 (bejbz.com.cn) Biolinkedin相關產品 Biolinkedin今天就分享到這里啦,有興趣的小伙伴可以登錄我們官網bejbz.com.cn或者關注我們公眾號,和我們隨時交流。
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