急性腎損傷(acute kidney injury, AKI)缺乏特異性治療藥物,新型AKI生物標志物胰島素樣生長因子結合蛋白7(Insulin-like growth factor binding protein 7, IGFBP7)已被美國食品藥品監督管理局批準用于臨床不同類型AKI的風險預測。2022年,安徽醫科大學藥學院藥理學團隊在腎臟領域權威期刊《國際腎臟病雜志(Kidney In...
Biolinkedin產品優化調整通知.pdf
mRNA是由DNA的一條鏈作為模板轉錄而來的、攜帶遺傳信息的能指導蛋白質合成的一類單鏈核糖核酸。真核細胞的mRNA分子最顯著的結構特征是具有5’端帽子結構(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。絕大多數哺乳類動物細胞mRNA的3’端存在20-30個腺苷酸組成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。這種結構為真核mRNA的提取,提供了極為方便的選擇性標志。Biolinkedin? Ol...
DNA雙鏈斷裂是最嚴重的DNA損傷形式。同源重組修復是精準修復DNA雙鏈斷裂的主要機制,也是利用基因組編輯工具(如 CRISPR/Cas9)進行基因打靶的基礎。然而,植物的同源重組效率很低,其調控機制也還很不清楚。轉錄因子SOG1是植物DNA損傷應答的核心蛋白之一,被認為是動物p53的同功能蛋白。p53是被研究最多的蛋白,也是最重要的抑癌蛋白。與p53相比,人們對SOG1還知之甚少。202...
A. 什么是包涵體? 包涵體是一種不溶的蛋白質形態,往往蛋白在大腸桿菌或其他表達宿主內高水平表達時,由于表達速率過快,部分蛋白部分折疊或錯誤折疊,會有暴露在外的疏水區與其他結構類似的蛋白形成的聚集物。B.如何盡量避免形成包涵體? 1.延緩蛋白表達,可以降低誘導溫度或降低IPTG(0.01-0.1mM)并延長誘導時間,或者構建質粒時采用較弱的啟動子。 2.更換標簽質粒,比如使用含有...
我們體外表達蛋白過程經常會遇到蛋白失活的現象,蛋白質失活受多種因素影響,除了與蛋白本身特性外,儲存條件也是關鍵。比如溫度,水,PH,離子強度,保存時間以及容器等,不合適的儲存條件會造成蛋白聚合,重要氨基酸的變化比如二硫鍵還原,肽鍵水解,氨基酸消旋,色氨酸,甲硫氨酸的氧化等,所以合適的保存條件對蛋白的穩定性至關重要,下面具體介紹幾種常用的保存方法。目前蛋白保存以液體保存和凍干保存為主。因蛋白不...
緩沖體系在蛋白制備純化過程中非常重要,合適緩沖液能確保蛋白活性和結構穩定。為了滿足蛋白后續純化,往往需要對緩沖液進行置換。下面介紹幾種常見的純化場景,場景一:針對分泌表達蛋白或抗體,其存在于培養基或腹水中,相對成分復雜,后續純化需要置換緩沖體系,避免影響親和純化的效率。場景二:有些蛋白經過親和純化后需要進行進一步純化(如離子交換層析),在進行離子交換之前需要將鹽離子降低或pH調整,此時需要置...
IP(免疫沉淀)實驗抗體如何選?
一、谷胱甘肽S-轉移酶(GST)概述1.1 谷胱甘肽S-轉移酶(GST)結構[1]谷胱甘肽S-轉移酶(GST)是由多基因編碼、具有多種功能的超家族酶,GST廣泛存在于細菌、真菌、動物和植物體內的一種解毒系統中,其專一性催化還原型的谷胱甘肽巰基與其他化合物的親電基團,生成谷胱甘肽衍生物,具有降低化學反應活性的效應。在各種生物體內,GSTs是由多個基因編碼的、具有多種功能的一組同工酶,分子量為2...
一、金屬螯合親和技術1.1 金屬螯合親和技術概述及其原理[1]金屬螯合親和技術屬于親和技術的一個分支。1975年Porath首次發現某些蛋白質與某些金屬離子(如Cu2+、Fe2+)之間的親和力可以作為現代色譜技術中蛋白質分離與純化的基礎驅動力(主要包括Zn2+、Cd2+、Hg2+、Co2+、Ni2+等過渡金屬離子),并指出固定金屬親和技術是基于蛋白質與金屬離子的特異性結合的相互作用過程來實現...
自噬(Autophagy)是真核生物中一種高度保守的分解代謝過程,涉及到細胞器、大分子或入侵的微生物,隔離并轉運至溶酶體進行降解。p62/SQSTM1(Sequestosome 1)是第一個被發現的,也是最重要的自噬受體,它具有與泛素(ubiquitin)和LC3相互作用的結構域,能結合泛素化修飾的蛋白,并運輸到自噬體。近日,Military MedicalResearch (IF 34....
蛋白-蛋白相互作用(Protein-Protein Interaction, PPI)介導了許多的生物學過程,其在催化、轉運、信號傳導等許多生命過程中具有重要的意義。鑒定蛋白質與蛋白質之間的相互作用(protein-protein interaction,PPI)是后基因組時代的重要研究內容。 蛋白-蛋白相互作用類型a:兩個球狀蛋白預先形成一個表面,然后靠近再產生相互作用b:兩個球狀蛋白在靠...
一、Flag標簽概述圖1 立個Flag我們這里所說的Flag和平時大家說的立個flag可不是同一件事,初學者可別弄錯了。親和標簽指的是對特定生物或化學配基具有高特異性的蛋白或短肽,兼具高親和性、純化條件溫和、純化步驟簡易和適用性廣的優勢。而Flag融合標簽作為其中的佼佼者,是專門為蛋白純化和檢測而設計的親水性短肽,由八個氨基酸組成(Asp-Tyr-Lys-Asp-Asp-Asp-Asp-...
受自然生物學的啟發,生物工程修飾細胞膜偽裝納米技術得到了廣泛的研究。許多研究人員致力于開發部位特異性治療藥物遞送系統。目前,各種腫瘤活性靶向配體(蛋白質、多肽、全長單抗)已被用于轉基因細胞膜微囊。此外,細胞膜來源的囊泡作為小分子的載體,由于其具有高生物相容性和包封率、大小可控、易于遺傳修飾和非常靈活地包裹各種生物活性分子的優點而備受關注。將近紅外(NIR)熒光染料包裹在生物工程納米囊泡中可以...
一、親和標簽和標簽抗體20世紀70年代親和標簽技術極大地促進了外源融合蛋白和蛋白質復合體的生產純化,蛋白或者短肽親和標簽現已作為蛋白研究領域必不可少的工具。親和標簽指的是對特定生物或化學配基具有高特異性的蛋白或短肽,兼具高親和性、純化條件溫和、純化步驟簡易和適用性廣的優勢。作為一個無可挑剔的親和標簽需要滿足以下幾點特質:(1)通用性。在任何表達宿主或系統中表達的融合蛋白均能實現分離和純化。(...
Biolinkedin夏季狂歡! 全場送送送Biolinkedin夏季狂歡活動——活動日期:2022年6月16日至2022年7月31日1. 凡購買蛋白磁珠系列 1mL包裝規格,送四孔磁力架一個2. 凡購買蛋白磁珠系列 5mL包裝規格,送金士頓U盤(64G)一個1. 凡購買抗體磁珠系列 1mL包裝規格,送四孔磁力架一個2. 凡購買抗體磁珠系列 5mL包裝規格,送旋轉混勻儀一臺Biolinked...
一、抗體親和純化純化抗體的方法多種多樣,其選擇取決于后續應用、來源種類、免疫球蛋白(Ig)類別和亞類以及起始材料的來源。認識到沒有一種單一的方法可以滿足所有應用的需求是很重要的,但是本文中詳細介紹了適用于大多數IgG純化的常用方法。為了最大限度地純化IgG,我們利用高容量IgG結合特異性細菌蛋白固定在固相載體上,如瓊脂糖凝膠或瓊脂糖磁珠。用于純化抗體的細菌蛋白,如(1)來自金黃色葡萄球菌的P...
mRNA疫苗技術關鍵原料-oligo-dT磁珠、SA磁珠
近年來心力衰竭的發病率和死亡率逐年增加,是危害人類健康的重大公共衛生問題,盡管規范化的藥物治療顯著改善心衰的臨床癥狀,但其主要心血管事件如心衰再住院、心血管死亡發生率仍居高不下。目前大多數干預措施都集中在緩解癥狀上。因此,闡明心衰進展的機制以改善心臟功能和預后非常重要。既往研究表明,線粒體功能障礙在心力衰竭的進展中起關鍵作用。然而,潛在的機制仍不清楚。線粒體能量受損、心肌細胞死亡和纖維化有助...
多發性骨髓瘤(Multiple Myeloma, MM)是一種常見于中老年人血液系統漿細胞惡性腫瘤,隨著我國人口老齡化不斷增長,MM發病率呈明顯上升趨勢。當前MM重要臨床問題是耐藥所誘導的復發難治。課題組前期發現在MM和多種腫瘤中染色體不穩定基因NEK2高表達,并與預后生存密切相關;近日,中南大學腫瘤研究所周文教授研究團隊在Advanced Science(IF:16.8)雜志上發表了《Ge...